儲存條件
2-8℃
中文名稱
直鏈淀粉含量檢測試劑盒微量法
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Amylose Content Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號：BC4265-100T/96S

更新時間：2024-04-15

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1243

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-微量法

水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測盒微量法生化試劑盒

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產(chǎn)品介紹

直鏈淀粉含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC4265
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體110 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑三	液體55 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	-	2-8℃保存
試劑五	液體0.5 mL×1支	2-8℃保存
試劑六	液體10mL×1支	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：*100 mL自備；
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年；
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的直鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產(chǎn)品說明：
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷鍵鏈接的多糖鏈，直鏈淀粉含量影響著食品的食用品質(zhì)和外觀品質(zhì)，與食品安全息息相關(guān)。
直鏈淀粉和碘形成藍(lán)色絡(luò)合物，利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應(yīng)得到直鏈淀粉含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0019 mg/mL
線性范圍：0.025-0.8 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管、蒸餾水。
操作步驟：

樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

稱取0.01g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。

二、測定步驟

分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)雙波長至550nm和485nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：取40μL 10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入960μL試劑四，充分混勻，配制成0.4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實驗中每管需要20μL，為減小實驗誤差，故配制大體積。）
操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑) ：

試劑名稱	測定管	標(biāo)準(zhǔn)管	空白管
樣本（µL）	20	-	-
標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL）	-	20	-
蒸餾水（µL）	-	-	20
試劑五（µL）	4	4	4
試劑六（µL）	4	4	4
蒸餾水（µL）	172	172	172
充分混勻，測定550nm和485nm處的吸光值，550nm下的測定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白，485nm下的分別記為A’測定、A’標(biāo)準(zhǔn)和A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測1-2次。

三、直鏈淀粉含量計算
直鏈淀粉含量（mg/g質(zhì)量）=ΔA測定÷（ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn)）×V樣總÷W=2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，0.4mg/mL；V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：

反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測完成防止褪色。
若A測定大于0.95，建議樣本上清用試劑四稀釋后再進(jìn)行測定；若A測定低于0.07時，可以提取時減少試劑四體積進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

取0.01g烘干玉米于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（*）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清，之后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.395-0.047）-（0.283-0.058）=0.123，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）=（0.517-0.047）-（0.317-0.058）=0.211，按樣本質(zhì)量計算含量得：直鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=116.59 mg/g 質(zhì)量。