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當前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法輔酶Ⅱ系列BC1150-50T/48S硫氧還蛋白還原酶活性檢測試劑盒 輔酶

硫氧還蛋白還原酶活性檢測試劑盒 輔酶
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
硫氧還蛋白還原酶活性檢測試劑盒 輔酶
有效期
6個月
單位

英文名稱
Oxidized Thioredoxin Reductase(TrxR) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC1150-50T/48S

更新時間:2024-04-07

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1870

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產(chǎn)品介紹


硫氧還蛋白還原酶(TrxR)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC1150
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制:

  1. 試劑三:試劑放于瓶內(nèi)玻璃瓶中,臨用前取1瓶加入3.33 mL蒸餾水溶解,用不完的試劑-20℃保存2;

  2. 試劑四:體積量少,請離心后再使用。臨用前根據(jù)樣本數(shù)量將試劑四用無水乙醇稀釋10倍后使用。

產(chǎn)品說明:
    TrxREC,EC 1.8.1.9是一種NADPH依賴的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxRGR活性類似,催化*G還原生成GSH,是谷胱*肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNBNADP+,TNB在412nm有特征吸收峰,但還原型谷胱*肽與DTNB同樣能反應(yīng)生成TNB,因此本試劑盒利用2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型谷胱*肽,通過測定412nm波長處TNB的增加速率,即可計算TrxR活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、蒸餾水、冰和無水乙醇。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:

  1. 哺乳動物組織及血液制品TrxR活力測定時,一般須用蒸餾水稀釋5倍左右;測定過程操作須迅速。

  2. 由于試劑一中含有一定濃度的蛋白(約0.1mg/mL),所以在測定樣蛋白濃度時需要減去提取液本身的蛋白含量。

實驗實例:

  1. 取0.1g月季花朵加入1mL 試劑一進行冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上,按照測定步驟操作,測得計算ΔA =A2測定-A1測定)-A2空白-A1空白)=0.763-0.716)-(0.082-0.064)=0.029,按樣本質(zhì)量計算酶活得:TrxR(U/g 質(zhì)量)=147×ΔA測定管-ΔA空白管)÷W=42.63 U/g 質(zhì)量。

  2. 取0.1g小鼠肝臟組織加入1mL 試劑一進行冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清稀釋2倍置冰上,按照測定步驟操作,測得計算ΔA =A2測定-A1測定)-A2空白-A1空白)=1.508-0.4)-(0.082-0.064)=1.09,按樣本質(zhì)量計算酶活得:TrxR(U/g 質(zhì)量)=147×ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×2(稀釋倍數(shù))=3204.6 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)發(fā)表文獻:

  1. Li B, Li D, Jing W, et al. Biogenic selenium and its hepatoprotective activity[J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 1-11.

  2. Zhang L, Fan J, He J, et al. Regulation of ROS–NF‐κB axis by tuna backbone derived peptide ameliorates inflammation in necrotizing enterocolitis[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 14330-14338.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1170/ BC1175 還原型谷*甘肽GSH含量檢測試劑盒
BC1180/ BC1185 氧化型谷*甘肽*G含量檢測試劑盒
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