儲存條件
2-8℃
中文名稱
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒輔酶
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Isocitrate Dehydrogenase Cytoplasmic(ICDHc) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC0400-50T/48S

更新時間：2024-04-24

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1703

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒

胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC0400
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體100 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2支	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑一：用時加入50 mL提取液溶解；
試劑二：用時每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用；
試劑三：用時每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用；
工作液配制：將試劑一、試劑二、試劑三按85：1：1的比例混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明：
ICDHc（EC 1.1.1.42）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化異檸檬酸脫氫脫羧生成α-酮戊二酸，同時還原NADP⁺生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源，在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。
利用ICDHc催化NADP⁺還原成NADPH反應(yīng)，在340nm下測定NADPH濃度的增加，即可反映ICDHc活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
“具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件"
注意事項：
1、若A2-A1大于0.5，需將酶液用提取液稀釋，使A2-A1小于0.5，可提高檢測靈敏度。若初始值A1大于0.5可嘗試將酶液用提取液稀釋。
2、實驗時，試劑二、試劑三和樣本在冰上放置，以免變性和失活；工作液37℃水浴放置。
3、比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
4、最好兩個人同時做此實驗，一個人比色，一個人計時，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
實驗實例：

取0.1g稗草，加入1mL提取液，進行冰浴勻漿，然后8000g 4℃離心10min，取上清，之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A2-A1=0.240-0.224=0.016，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

ICDHc活性（U/g 質(zhì)量）=1608×ΔA÷W=257.28 U/g 質(zhì)量。

取0.1g小鼠肺部組織，加入1mL提取液，進行冰浴勻漿，然后8000g 4℃離心10min，取上清稀釋5倍，之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A2-A1=0.253-0.141=0.112，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

ICDHc活性（U/g 質(zhì)量）=1608×ΔA÷W×5=9004.8 U/g 質(zhì)量。

取小鼠血清樣本直接檢測，測得計算ΔA=A2-A1=0.225-0.2=0.025，按血清計算得：

ICDHc活性（U/mL）=1608×ΔA=40.2 U/mL。
參考文獻：

Miake F, TORIKATA T, KOGA K, et al. Isolation and characterization of NADP+-specific isocitrate dehydrogenase from the pupa of Bombyx mori[J]. The Journal of Biochemistry, 1977, 82(2): 449-454.

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