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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法ATP系列BC0960-50T/24SCa++Mg++ ——ATP酶測試盒

Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒
產品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Ca++Mg++ ——ATPase Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產品型號:BC0960-50T/24S

更新時間:2024-04-24

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :2318

服務熱線

010-50973130

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產品介紹


Ca++Mg++-ATP酶活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC0960
規(guī)格:50T/24S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體4 mL×1 瓶2-8℃保存
試劑三粉劑×2-20℃保存
試劑四液體2 mL×1瓶2-8℃保存
試劑五液體3 mL×1瓶2-8℃保存
試劑六粉劑×12-8℃保存
試劑七粉劑×12-8℃保存
試劑八液體15 mL×1 瓶常溫保存
標準品液體1 mL×1支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑三:臨用前取1支加入1 mL蒸餾水充分混勻待用;現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑-20℃分裝保存一周。

  2. 試劑六:臨用前加入15 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。

  3. 試劑七:臨用前加入15 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。

  4. 標準品:10mmol/L 標準磷貯備液。將標準品 20倍稀釋,即取0.1 mL標準品加1.9 mL蒸餾水充分混勻,配成0.5 μmol/mL標準磷應用液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  5. 定磷劑的配制:按H2O:試劑六:試劑七:試劑八=2:1:1:1(體積比)的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑根據樣本量現(xiàn)用現(xiàn)配。

注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產品說明:
Ca++Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。
根據Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。


注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、低溫離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項:

  1. 由于每一個樣都必須做對照,本試劑盒50管只能測24Ca++ Mg++-ATP酶。

  2. 此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管要求嚴格無磷。避免磷污染是檢測成敗的關鍵。

實驗實例:

  1. 取0.1g胰腺加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=0.916-0.389=0.527,ΔA標準=0.398-0.004=0.394,按樣本質量計算酶活得:

Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 質量) =7.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W=100.32 U/g 質量。

  1. 取0.1g柳樹加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=0.137-0.124=0.013,ΔA標準=0.398-0.004=0.394,按樣本質量計算酶活得:

Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 質量) =7.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W=2.47 U/g 質量。
相關發(fā)表文獻:

  1. Zhengwen Zhou,Yue Zhang,Luning Lin,et al. Apigenin suppresses the apoptosis of H9C2 rat cardiomyocytes subjected to myocardial ischemia-reperfusion injury via upregulation of the PI3K/Akt pathway. Molecular Medicine Reports. May 2018;(IF1.851)

參考文獻:

  1. Datiles M J, Johnson E A, McCarty R E. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Bioenergetics, 2008, 1777(4): 362-368.


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